如細(xì)胞培養(yǎng)體系中存在支原體污染，可能造成細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢、染色體異常、代謝異常、轉(zhuǎn)染效率低、病毒包裝效率低、細(xì)胞死亡等。造成實(shí)驗(yàn)重復(fù)性低、結(jié)果不可信。由于支原體大小為0.1-0.3μm，無(wú)法通過(guò)過(guò)濾去除，無(wú)細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)，普通抗生素如青霉素等也無(wú)效，造成研究者細(xì)胞損失。

北京澤平代理的Lonza支原體系列產(chǎn)品，提供從支原體檢測(cè)、支原體清除、到支原體預(yù)防的全套試劑和配套檢測(cè)儀器，輕松解決各類支原體污染問(wèn)題。
 

一、Lonza支原體檢測(cè)試劑盒

Lonza MycoAlert支原體檢測(cè)試劑盒（MycoAlert PLUS Mycoplasma Detection Kit），可在20分鐘內(nèi)快速檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)物是否存在支原體污染。其利用了180多種支原體中廣泛存在的支原體酶（在脲原體屬、細(xì)菌、酵母中少見(jiàn)），當(dāng)活支原體被MycoAlert試劑裂解后，支原體酶釋放到培養(yǎng)液中，并與MycoAlert底物特異性反應(yīng)，催化ADP轉(zhuǎn)化為ATP，ATP與熒光素酶發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生光信號(hào)，通過(guò)檢測(cè)底物加入前后讀數(shù)的比值，可判斷樣本中是否含有支原體。



①酶學(xué)檢測(cè)，操作簡(jiǎn)單，20分鐘出結(jié)果，輕松量化陰性、陽(yáng)性；
②覆蓋范圍廣，可檢測(cè)44種支原體，包含細(xì)胞培養(yǎng)中最常見(jiàn)的6種支原體（口腔支原體、精氨酸支原體、豬鼻支原體、萊氏無(wú)膽甾原體、發(fā)酵支原體、唾液支原體，占支原體污染的95%）




支原體檢測(cè)流程

1、取2mL培養(yǎng)基上清（建議培養(yǎng)48小時(shí)以上），200g離心5分鐘，去除細(xì)胞和細(xì)胞碎片；
2、取100μL上清，加入100μL裂解試劑（MycoAlert PLUS Reagent，含裂解試劑、熒光素酶、熒光素），裂解支原體；
3、室溫22℃（不超過(guò)25℃）孵育5分鐘，檢測(cè)背景ATP，測(cè)量發(fā)光值得到讀數(shù)A；
4、加入100μL支原體酶特異性底物（MycoAlert PLUS Substrate）；
5、室溫孵育10分鐘，測(cè)量發(fā)光值得到讀數(shù)B，計(jì)算B/A比值。
 

結(jié)果解讀

二、支原體檢測(cè)儀器

1、Lonza專用單孔生物發(fā)光檢測(cè)儀器Lucetta 2

①小型便攜式管式光度計(jì)，一鍵式檢測(cè)，不需要復(fù)雜的軟件設(shè)置；
②應(yīng)用廣泛，兩種基本檢測(cè)模式，高靈敏度和線性度，最多可儲(chǔ)存2000個(gè)單一樣本讀數(shù)；
③無(wú)特殊耗材，只需要無(wú)菌1.5mL離心管即可檢測(cè)。

 

2、多孔單功能發(fā)光檢測(cè)儀或多功能酶標(biāo)儀

如使用多功能酶標(biāo)儀檢測(cè)，要選擇Luminescence檢測(cè)功能，不需要設(shè)置濾光片；如果使用多孔板檢測(cè)，要用不透明的白板或黑板。

 

三、Lonza支原體清除試劑盒

當(dāng)發(fā)現(xiàn)存在支原體污染，但樣品格外難得不可丟棄時(shí)，Lonza MycoZap支原體去除試劑，可在4天內(nèi)清除支原體，拯救珍貴的細(xì)胞樣品。MycoZap支原體去除試劑，結(jié)合抗生素和抗代謝試劑，確保徹底清除支原體。在隨后的4-6周內(nèi)，可以使用Lonza MycoAlert支原體檢測(cè)試劑盒進(jìn)行不間斷檢測(cè)，以保證后續(xù)培養(yǎng)物不被污染。

①使用范圍廣，可徹底清除支原體、無(wú)膽甾原體、植物花螺原體等柔膜菌綱物種；
②使用簡(jiǎn)單，只需將支原體清除試劑加入培養(yǎng)基中；
③細(xì)胞毒性小，不影響細(xì)胞正常培養(yǎng)。



 

四、Lonza支原體預(yù)防試劑盒

Lonza MycoZap支原體預(yù)防試劑（MycoZap Prophylactic），是一種特異性預(yù)防支原體污染的抗生素，其中MycoZap Plus可預(yù)防包括支原體、革蘭氏陽(yáng)性菌、革蘭氏陰性菌、真菌、酵母在內(nèi)的多種微生物污染，其配方根據(jù)細(xì)胞系、原代細(xì)胞進(jìn)行了特殊優(yōu)化。

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